Elektrofores vad det är, vad det är för och hur det görs

Elektrofores är en laboratorieteknik som utförs med målet att separera molekyler enligt deras storlek och elektriska laddning så att diagnos av sjukdomar kan göras, proteinuttryck kan verifieras eller mikroorganismer kan identifieras.

Elektrofores är ett enkelt och billigt förfarande som används i laboratorierutiner och i forskningsprojekt. Enligt syftet med elektroforesen kan det vara nödvändigt att utföra andra tester och prov för att nå en diagnos, till exempel.

Vad är det för

Elektrofores kan utföras för flera syften, både i forskningsprojekt och för diagnos, eftersom det är en enkel och billig teknik. Således kan elektrofores utföras för att:

Identifiera virus, svampar, bakterier och parasiter, varvid denna applikation är vanligare i forskningsprojekt;
Faderskapstest;
Kontrollera uttrycket av proteiner;
Identifiera mutationer, till exempel användbar vid diagnos av leukemi;
Analysera de typer av cirkulerande hemoglobin, vilket är användbart vid diagnos av sigdcellanemi;
Bedöm mängden proteiner som finns i blodet.

Enligt syftet med elektroforesen kan det vara nödvändigt att utföra andra komplementära test för att läkaren ska slutföra diagnosen.

Hur det görs

För att göra elektrofores är det nödvändigt att gelén, som kan vara av polyakrylamid eller agaros beroende på objektivet, elektroforesbuffert och kar, molekylviktmarkör och ett lysrör, förutom en UV- eller LED-ljusutrustning, även känd som transilluminator.

Efter beredningen av gelén måste ett specifikt föremål placeras så att brunnarna görs i gelén, populärt kallad kammen, och låt gelén sätta sig. När gelén är klar, applicera bara ämnena på brunnarna. För detta måste en molekylviktmarkör placeras i en av brunnarna, en positiv kontroll, som är det ämne som är känt vad det är, en negativ kontroll, som garanterar reaktionens giltighet, och proverna som ska analyseras. Alla prover måste blandas med ett fluorescerande färgämne, eftersom det på detta sätt är möjligt att visualisera band på transilluminatorn.

Gelén med proverna måste placeras i elektroforesvatten, som innehåller den specifika buffertlösningen, och sedan slås enheten på så att det finns elektrisk ström och följaktligen potentialskillnad, vilket är viktigt för separationen partiklar beroende på deras belastning och storlek. Den elektroforetiska drifttiden varierar beroende på syftet med proceduren och kan vara upp till 1 timme.

Efter den bestämda tiden är det möjligt att se resultatet av den elektroforetiska körningen genom transilluminatorn. När gelén placeras under UV- eller LED-ljus är det möjligt att visualisera bandmönstret: ju större molekylen, desto mindre dess migration, närmare brunnen, medan ju lättare molekylen är, desto större migrationspotential.

För att reaktionen ska valideras är det nödvändigt att banden för den positiva kontrollen visualiseras och att i den negativa kontrollen ingenting visualiseras, eftersom det annars är en indikation på att det fanns förorening, och hela processen måste upprepas.

Typer av elektrofores

Elektrofores kan utföras för olika ändamål och enligt dess syfte kan flera typer av geler användas, varvid den vanligaste är polyakrylamid och agaros.

Elektrofores för att identifiera mikroorganismer är vanligare att utföras i forskningslaboratorier, men för diagnostiska ändamål kan elektrofores användas för att identifiera hematologiska sjukdomar och sjukdomar som utvecklas med ökningen av mängden proteiner, som är de viktigaste typerna av elektrofores :

1. Hemoglobinelektrofores

Hemoglobinelektrofores är en laboratorieteknik som utförs för att identifiera de olika typerna av hemoglobin som cirkulerar i blodet, vilket gör det möjligt att identifiera förekomsten av sjukdomar relaterade till hemoglobinsyntes. Typen av hemoglobin identifieras med hjälp av elektrofores vid ett specifikt pH, helst mellan 8,0 och 9,0, med ett mönster av band som verifieras som kan jämföras med det normala mönstret, vilket möjliggör identifiering av närvaron av onormala hemoglobiner.

Vad den är gjord för: Hemoglobinelektrofores utförs för att undersöka och diagnostisera sjukdomar relaterade till hemoglobinsyntes, såsom sigdcellanemi och hemoglobin C-sjukdom, förutom att de är användbara vid differentiering av talassemi. Lär dig att tolka hemoglobinelektrofores.

2. Proteinelektrofores

Proteinelektrofores är en undersökning som läkaren begär att bedöma mängden proteiner som cirkulerar i blodet och därmed identifiera sjukdomar. Detta test görs från ett blodprov, som centrifugeras för att erhålla plasma, den del av blodet som bland annat består av proteiner.

Efter elektrofores kan ett mönster av band visualiseras och därefter en graf i vilken mängden av varje fraktion av proteiner indikeras, vilket är grundläggande för diagnosen.

Vad den är gjord för: Proteinelektrofores gör det möjligt för läkaren att undersöka förekomsten av multipelt myelom, dehydrering, skrump, inflammation, leversjukdom, pankreatit, lupus och hypertoni enligt bandmönstret och diagrammet som presenteras i undersökningsrapporten.

Förstå hur det görs och hur man förstår resultatet av proteinelektrofores.