Molekylär diagnos vad det är, vad det är för och hur det görs
Molekylär diagnos motsvarar en uppsättning molekyltekniker som syftar till att identifiera förändringar i DNA som kan vara ett exempel på genetiska sjukdomar eller cancer. Dessutom används molekyltekniker i stor utsträckning för identifiering och bekräftelse av infektionssjukdomar, eftersom de representerar en snabbare och mer exakt diagnostisk metod.
Molekylär diagnos är dyr och begärs därför inte så ofta av läkare, men den ger exakta resultat med avseende på närvaron av förändringen, hur den kan påverka organismens funktion och patientens svar på behandling.
Vad är det för
Molekylär diagnos kan utföras med flera mål, varav de viktigaste är:
- Identifiering av mutationer relaterade till leukemi, såsom identifiering av BCR-ABL-translokationen, som är karakteristisk för kronisk myeloid leukemi (CML);
- Karakteristiska mutationer av hematologiska sjukdomar, såsom ärftlig hemokromatos, polycythemia vera, essentiell trombocytemi och trombofili, till exempel.
- Molekylära förändringar som indikerar förekomsten av cancer, såsom kolorektal, lung-, bröst- och hjärncancer, till exempel;
- Diagnos av infektionssjukdomar, såsom hepatit, uretrit, toxoplasmos, leishmaniasis, etc., förutom HPV-virus.
Molekylär diagnos, trots att den anses vara dyr jämfört med andra diagnostiska tekniker, är mer exakt, eftersom den kan informera om förändringen relaterad till en viss sjukdom och graden av inflytande av denna förändring i kroppen och därmed hjälpa personens behandling..
Förutom att de används för diagnos av flera sjukdomar, används även molekyltekniker för att utvärdera responsen på behandling, särskilt hos personer med cancer, eftersom de är en av de mest effektiva metoderna för att indikera progression och återfall av sjukdomar.
Hur det görs
Den molekylära diagnosen kan utföras med vilket prov som helst, på begäran av läkaren den som bäst kan ge information om patientens tillstånd, som kan vara urin, saliv eller, i de flesta fall, blod. Fasta eller någon annan förberedelse är inte nödvändigt för tentamen.
Provet samlas in och skickas till laboratoriet tillsammans med läkarens vägledning som informerar om undersökningen eller typen av forskning som bör göras. Den utförda molekyltekniken beror på den begärda undersökningen och omfattar en serie exakta procedurer som syftar till att identifiera närvaron eller frånvaron av den förändring som läkaren begär.
Vanligtvis används endast en liten mängd skickat prov, resten lagras så att, om nödvändigt, examen upprepas.
Se vad som är de viktigaste molekylära teknikerna
PCR
den PCR, kort för Polymerase Chain Reaction eller Polymeraskedjereaktion, är en molekylär teknik som består av amplifiering av ett fragment av genetiskt material, vare sig DNA eller RNA, för att identifiera mutationer och därmed hjälpa till vid diagnos av sjukdomar.
Denna teknik är tillverkad av extraktion och rening av det genetiska materialet, som sedan placeras i en blandning där en av komponenterna är ett restriktionsenzym som varierar beroende på den begärda undersökningen och vars funktion är att skära materialet i fragment så att den möjliga genetiska förändringen kan identifieras. Blandningen placeras i en termocykler, som är en anordning som verkar genom den temperaturvariation som indikeras av proffsen enligt undersökningen och därmed möjliggör amplifiering av det genetiska fragmentet. När det gäller konventionell PCR utsätts PCR-produkten efter amplifiering elektrofores, vilket är en molekylär teknik baserad på vikten och storleken på fragmenten, det vill säga enligt dessa egenskaper genereras ett bandmönster, vars analys görs baserat på det positiva kontrollbandet, det vill säga bandet som är känt som motsvarar den genetiska förändringen.
den PCR i realtid, även kallad qPCR, det är en typ av kvantitativ PCR, det vill säga, förutom att identifiera den genetiska förändringen, den kan ge information om genuttryck, det vill säga hur mycket den förändrade genen uttrycks i organismen, och därmed kunna vara används för att underlätta diagnos och övervaka behandling. PCR i realtid kräver inte elektrofores, hela processen för att förstärka och analysera genetiskt material görs av en anordning och resultatet tolkas av en utbildad hälso- och sjukvårdspersonal.
sekvensering
den sekvensering är en molekylär teknik som består av att bestämma sekvensen för DNA-nukleotider, som är de bildande enheterna av genetiskt material. Sekvensering sker från en reaktion som liknar PCR, men i amplifieringsblandningen tillsätts modifierade nukleotider genom tillsats av fluorokromer, som när materialet förstärks, de modifierade nukleotiderna införlivas i DNA och genererar flera fragment, som motsvarar sekvenseringsprodukten.
Reaktionsprodukten placeras i en anordning som kallas DNA-sequencer, i vilken, när fragmenten nås med utrustningens laser, fluorokromerna exciteras och avger fluorescens, vilket indikeras av utrustningen med hjälp av toppar, med varje topp motsvarande till en nukleotid. I slutet av reaktionen kommer utrustningen att informera DNA-sekvensen och därmed kunna hjälpa läkaren vid diagnosen genetiska sjukdomar..
